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为什么要细胞计数?

  • 发布日期:2022-12-21      浏览次数:116
    •   在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。准确的细胞计数对评估培养的细胞生长是至关重要,因为错误的计数会导致关于细胞健康的错误结论。细胞计数可以使用血球计数板、自动计数器进行。细胞计数一般用血细胞计数板,按白细胞计数方法进行计数,便于确定细胞的生活状况。
       
        细胞生长的每个阶段:
       
        停滞期:细胞适应培养条件的阶段,细胞在此阶段不分裂。细胞通常在起始培养后的24小时内附着,该阶段的总时长取决于培养之初使用细胞的生长阶段和接种密度。
       
        对数期:细胞在此阶段积极分裂,是评估群体生长和通用数据收集的时间。对数期的后期,过度拥挤导致细胞胁迫之前是传代细胞(亚培养)的时机。
       
        平稳期:随着细胞达到100%融合,细胞在此阶段生长放缓,不足1/10的细胞处于活跃细胞周期。细胞在此阶段容易受伤,因此需要小心观察以确保细胞在此阶段之前或之初进行传代。
       
        衰退期:细胞周期的自然组成部分。在此阶段,随着细胞死亡占据主导地位,活细胞群体数量减少。
       
        细胞计数原理:细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种应先检查一下细胞的活力。
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