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基因检测试剂盒使用注意事项

  • 发布日期:2022-06-22      浏览次数:247
    •   基因检测试剂盒是根据SRY基因组的特点设计生物素标记的引物,PCR扩增SRY基因目的片段。将SRY基因特异性寡核苷酸探针固定在尼龙膜上。根据生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS)原理,将PCR扩增产物与固化在膜条上的探针杂交,洗膜后加入辣根过氧化合物酶标记的亲和素(POD),与PCR产物上的生物素结合。加入显色液(TMB,H2O2),辣根过氧化物酶催化其底物H2O2分解,TMB作为供氢体参与反应后产生蓝色的斑点。根据杂交信号斑点的有无来判断样本中是否存在SRY基因。本试剂盒能有效检测血浆中微量SRY基因。
       
        基因检测试剂盒使用注意事项:
        1、测定中需使用的所有试剂和96孔板提前30min放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意12连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;加样时,要注意各成分加入量的准确。例如,对于加入体积较大的成分来说应保证移液器的准确,而对于加样量较小的成分,除保证移液器的准确外,还应注意尽量将液体加入已有液体的液面之下,确保成分加入。操作应严格按照说明书要求及步骤进行,每批实验应保证与阴性对照和阳性对照同时进行检测与分析,以确保检测环境与检测试剂性能的合格。
        2、加样完毕后,依据试剂盒对应耗材选择正确且匹配的荧光PCR仪进行扩增反应及荧光收集。试剂使用前应充分摇匀;
        3、摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;
        4、使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;
        5、研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在4℃避光保存,但是建议在24h内测定;
        6、结果判读应以阳性对照作为标准,严格按照说明书进行,结果判读请在反应终止后15min内完成。
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