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细胞计数时的要点你都清楚么?

  • 发布日期:2022-04-26      浏览次数:202
    •   细胞计数又称血球计数板法,是细胞计数方法,显微镜下调整不同放大倍数的物镜,通过染色的方法人工观察细胞状态判断细胞死活,进行计数。通过检测出一定体积的均匀细胞悬液中的细胞个数(对一定数量的小格或中格计数,根据相应的小/中格所占的体积,可以推算出单位体积的溶液中微生物细胞的密度或总数),换算出每毫升的细胞个数,从而得到细胞悬液的细胞浓度。实验过程中采用五点取样法,即一般随计数室四角上的四个中方格以及正中间的一个中方格进行统计(对于压线的,采取数上不数下,数左不数右的原则)。这种方法数细胞的原则是只数完整的细胞,若细胞聚集成团时,按照1个细胞计算。
        细胞计数要点:
        ①进行细胞计数时,要求悬液中细胞数目不低于1×107 L-1,如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中。
        ②要求细胞悬液中的细胞分散良好,否则影响计数准确性。
        ③取样计数前,应充分混匀细胞悬液,尤其时多次取样计数时更要注意每次取样都要混匀,以求计数准确。
        ④数细胞的原则是只数完整的细胞,若细胞聚集成团时,只按照1个细胞计算。如果细胞压在格线上时,则只计上线,不计下线,只计右线,不计左线。
        ⑤操作时,注意盖片下不能有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中,否则要重新计数。
        初学者易犯的错误:计数前未将待测悬液吹打均匀。滴入细胞悬液时盖玻片下出现气泡。滴入悬液时的量太多,至使细胞悬液流入旁边的槽中。
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