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细胞计数的方法和原理主要是哪些呢?

  • 发布日期:2022-01-11      浏览次数:313
    •   细胞计数是细胞实验中非常重要的一个环节,科研工作者需要从多方面对培养的细胞进行分析,比如活细胞数、死细胞数、细胞存活率等。经典的通过台盼蓝染色方法对细胞进行人工计数,是我们研究细胞常备技能之一。随着科技发展,自动化的细胞计数仪应运而生,它以便捷、快速等优势被广泛应用到细胞实验中。
        细胞计数的方法和原理主要是哪些呢?
        1.手工显微镜法
        又称血球计数板法,是原始的细胞计数方法,显微镜下调整不同放大倍数的物镜,通过染色的方法人工观察细胞状态判断细胞死活,进行计数。通过检测出一定体积的均匀细胞悬液中的细胞个数(对一定数量的小格或中格计数,根据相应的小/中格所占的体积,可以推算出单位体积的溶液中微生物细胞的密度或总数),换算出每毫升的细胞个数,从而得到细胞悬液的细胞浓度。实验过程中采用五点取样法,即一般随计数室四角上的四个中方格以及正中间的一个中方格进行统计(对于压线的,采取数上不数下,数左不数右的原则)。这种方法数细胞的原则是只数完整的细胞,若细胞聚集成团时,按照1个细胞计算。
        2.库尔特原理又称电阻抗检测原理。细胞是相对不良导体,当细胞悬浮电解质中,将小孔管插入细胞悬液,使其管内充满稀释液,位于小孔管两侧电极产生稳定电流。当一个细胞通过小孔时,瞬间引起电压变化出现一个脉冲信号,细胞体积越大,引起脉冲越大,产生脉冲振幅越高,脉冲信号由下列步骤完成:①放大;②阈值调节;③甄别;④计数。采用这种计数原理的仪器具代表性的是CASY细胞计数仪,这种原理的仪器内置液路系统,需要定期清洗管路防止堵塞。
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